檢測MH-S細胞活性的核心方法是臺盼藍染色法，活細胞率應>90%?。該方法通過區分活細胞（拒染）與死細胞（藍色著色）來評估細胞膜完整性，是判斷MH-S細胞復蘇、傳代或藥物處理后狀態的最直接指標。
此外，還可結合以下多種手段綜合評估其功能活性與生理狀態：
1. ?基礎活力檢測：臺盼藍染色?
?原理?：死細胞膜通透性增加，可被臺盼藍染成藍色；活細胞則排斥染料，保持無色。
?操作步驟?：
取少量細胞懸液（約10 μL）與等體積0.4%臺盼藍溶液混合；
室溫避光孵育3–5分鐘；
滴加至細胞計數板，顯微鏡下觀察并計算活細胞比例。
?判定標準?：?活細胞率 >90% 為理想狀態?，低于80%提示細胞受損或操作不當 。
2. ?增殖能力評估：CCK-8或MTT法?
?適用場景?：用于藥物干預、毒性測試或長期培養后的功能驗證。
?常用方法?：
?CCK-8法?：更靈敏、操作簡便，適合懸浮/半貼壁細胞；
?MTT法?：依賴線粒體還原酶活性，生成紫色甲臜結晶，需溶解后測定吸光值。
?關鍵點?：需設置空白對照組，確保數據準確性 。
3. ?功能活性驗證：炎癥因子分泌檢測?
MH-S作為肺泡巨噬細胞模型，其核心功能在于響應刺激后分泌炎癥因子的能力：
?常用刺激物?：脂多糖（LPS，100 ng/mL）處理24小時；
?檢測指標?：
?TNF-α、IL-6、IL-1β? 水平可通過ELISA定量；
mRNA表達可通過qPCR檢測（如Il1b、Tnf基因上調）；
?意義?：即使形態正常，若無法響應LPS刺激，則提示功能退化或失活 。
4. ?吞噬功能檢測?
?實驗設計?：使用熒光標記微球（如FITC-葡聚糖或pHrodo標記細菌）與細胞共孵育。
?操作流程?：
將熒光微球加入細胞培養體系（比例按說明書）；
37℃孵育1–2小時（避免光照）；
PBS洗去未吞噬顆粒；
熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測吞噬率。
?結果解讀?：健康MH-S細胞吞噬率通常 >70% 。