判斷C1q抗體ELISA優化是否成功，關鍵看這五個核心指標是否達標：
一、靈敏度驗證
?標準品梯度稀釋?：用合成DNA或標準菌株做5個數量級稀釋（如10?–101 copies/mL），每個濃度做3次重復。
?Ct值判斷?：Ct值<40且擴增效率E在0.9–1.1之間為陽性。
?實際樣本測試?：用血漿/血清樣本驗證，避免基質效應干擾。
二、特異性驗證
?交叉反應測試?：用非目標蛋白（如其他補體蛋白）做實驗，確保無交叉反應。
?抗體特異性?：通過BLAST比對確認抗體僅識別C1q蛋白。

三、重復性驗證

?板內CV?：同一板內重復檢測，CV<10%。
?板間CV?：不同板間檢測，CV<10%。
?標準偏差?：同一濃度樣本多次檢測，標準偏差≤0.2。
四、線性范圍驗證
?標準曲線?：R2>0.98表示線性良好。
?動態范圍?：檢測范圍通常為6–7個數量級（如101–10? copies/mL）。
五、實際應用驗證
?樣本基質?：確保試劑盒適用于血漿、血清等樣本。
?質控品設置?：陽性、陰性、無模板對照驗證反應有效性。
?優化成功標志?：所有指標達標，且實際樣本檢測結果與理論值一致。