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ELISA法有哪些常見(jiàn)的假陽(yáng)性現(xiàn)象
發(fā)表時(shí)間:2025-12-03
ELISA法常見(jiàn)的假陽(yáng)性現(xiàn)象主要包括以下原因:
內(nèi)源性干擾物質(zhì)
?類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)?:人血清中的IgM/IgG型RF可與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的Fc段直接結(jié)合,導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?補(bǔ)體干擾?:補(bǔ)體C1q可橋連固相抗體與酶標(biāo)二抗的Fc段,引起假陽(yáng)性?。
?嗜異性抗體?:人類(lèi)血清中天然存在的抗體能與嚙齒動(dòng)物Ig結(jié)合,造成假陽(yáng)性?。
?嗜靶抗原自身抗體?:如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等自身抗體,可與靶抗原形成復(fù)合物干擾檢測(cè)?。
?醫(yī)源性抗鼠抗體?:接受鼠源性單抗治療或動(dòng)物咬傷患者體內(nèi)產(chǎn)生的抗鼠抗體可導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?交叉反應(yīng)物質(zhì)?:類(lèi)AFP等與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì),使用單抗檢測(cè)時(shí)可能假陽(yáng)性?。
?細(xì)菌污染?:細(xì)菌內(nèi)源性酶(如辣根過(guò)氧化物酶)可催化底物產(chǎn)生非特異性顯色?。
?標(biāo)本處理不當(dāng)?:抗凝不完全導(dǎo)致纖維蛋白殘留,洗滌不徹底時(shí)酶殘留引起假陽(yáng)性?。
?標(biāo)本保存不當(dāng)?:血液標(biāo)本保存過(guò)久易滋生細(xì)菌,影響檢測(cè)結(jié)果?。
操作因素
?加樣誤差?:加樣不準(zhǔn)或稀釋倍數(shù)大時(shí),誤差可能導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?洗滌不充分?:洗板不徹底會(huì)導(dǎo)致酶殘留,引起假陽(yáng)性?。
?溫育條件不當(dāng)?:試驗(yàn)溫度過(guò)高或過(guò)低可能引起血清蛋白異常,造成假陽(yáng)性?。
內(nèi)源性干擾物質(zhì)
?類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)?:人血清中的IgM/IgG型RF可與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的Fc段直接結(jié)合,導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?補(bǔ)體干擾?:補(bǔ)體C1q可橋連固相抗體與酶標(biāo)二抗的Fc段,引起假陽(yáng)性?。
?嗜異性抗體?:人類(lèi)血清中天然存在的抗體能與嚙齒動(dòng)物Ig結(jié)合,造成假陽(yáng)性?。
?嗜靶抗原自身抗體?:如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等自身抗體,可與靶抗原形成復(fù)合物干擾檢測(cè)?。
?醫(yī)源性抗鼠抗體?:接受鼠源性單抗治療或動(dòng)物咬傷患者體內(nèi)產(chǎn)生的抗鼠抗體可導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?交叉反應(yīng)物質(zhì)?:類(lèi)AFP等與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì),使用單抗檢測(cè)時(shí)可能假陽(yáng)性?。

標(biāo)本因素
?標(biāo)本溶血?:紅細(xì)胞釋放的亞鐵血紅素具有類(lèi)過(guò)氧化物酶活性,催化底物顯色(假陽(yáng)性)?。?細(xì)菌污染?:細(xì)菌內(nèi)源性酶(如辣根過(guò)氧化物酶)可催化底物產(chǎn)生非特異性顯色?。
?標(biāo)本處理不當(dāng)?:抗凝不完全導(dǎo)致纖維蛋白殘留,洗滌不徹底時(shí)酶殘留引起假陽(yáng)性?。
?標(biāo)本保存不當(dāng)?:血液標(biāo)本保存過(guò)久易滋生細(xì)菌,影響檢測(cè)結(jié)果?。
操作因素
?加樣誤差?:加樣不準(zhǔn)或稀釋倍數(shù)大時(shí),誤差可能導(dǎo)致假陽(yáng)性?。
?洗滌不充分?:洗板不徹底會(huì)導(dǎo)致酶殘留,引起假陽(yáng)性?。
?溫育條件不當(dāng)?:試驗(yàn)溫度過(guò)高或過(guò)低可能引起血清蛋白異常,造成假陽(yáng)性?。


